淀粉含量是某些食品的主要质量指标,是食品生产管理中常做的分析项目。其测定常用的方法为酶水解法和酸水解法,它是根据淀粉在酶或酸的作用下水解为葡萄糖后,再按还原糖测定方法进行测定,然后折算成淀粉含量。此外,也可利用淀粉的旋光性来测定淀粉的含量。下面介绍酶水解法(依据GB/T5009.9-2008第一法)。
1.原理
样品分别用乙醚或石油醚除去脂肪、乙醇除去可溶性糖类后,在淀粉酶的作用下,淀粉水解为低分子糊精和麦芽糖,再用盐酸进一步水解,得到最终水解产物葡萄糖:
然后按还原糖的测定方法进行测定,所得结果乘以换算系数0.9(即162n/180n),即为淀粉的含量。按下式计算:
式中x——试样中淀粉的含量,g100g
m1——测定用试样(样品水解液)中葡萄糖的质量,mg
m2——试剂空白中葡萄糖的质量,mg
m——称取试样质量,g
V——测定用试样处理液(水解液)体积,mL
0.9——以葡萄糖计换算成淀粉的换算系数
计算结果保留到小数点后一位。
2.要点提示
(1)淀粉酶具有专一性和选择性,只能使淀粉水解成麦芽糖,而不会水解其他多糖,水解后可以过滤除去其他多糖,所以酶水解法不受半纤维素、果胶等多糖的干扰,适合于其他多糖含量高的样品。其结果准确可靠,重现性好,但是酶催化活力的稳定性受pH和温度的影响很大,且操作繁琐、费时,使用上受到一定程度的限制。
(2)脂肪会妨碍酶对淀粉的作用及可溶性糖的去除,故应先用乙醚或石油醚除掉。试样中脂肪含量较少时,可省去乙醚溶解和洗去脂肪的操作。若试样为液体,则采用分液漏斗振摇后,静置分层,去除乙醚层。
(3)样品先用乙醚或石油醚除去脂肪,再用85%乙醇除去可溶性糖类,以防止淀粉随可溶性糖类一起被洗掉。
(4)淀粉酶使用前,应先确定其活力及水解时加入量。可用已知浓度的淀粉溶液少许,加入一定量淀粉酶溶液,置55~60℃水浴中保温lh,用碘液检验淀粉是否水解完全,以确定酶的活力及水解时的用量。另外由于淀粉酶溶液配制后活力降低较快,应临用新配,并贮存于冰箱中。在使用时,如温度高于85℃或有酸或碱存在,则会失去活力。
(5)淀粉粒具有晶格结构,淀粉酶难以作用,加热糊化可破坏淀粉的晶格结构,使其易于被淀粉酶作用。
(6)回流装置的冷凝管应较长,以保证水解过程中盐酸不会挥发,保持一定的浓度。
(7)淀粉的水解程序与碘的呈色反应如下:
水解程序:淀粉→蓝糊精→红糊精→消色糊精→麦芽糖→葡萄糖。
呈色反应:紫蓝色→蓝色→红色→无色→无色→无色。
相关链接:食品中蔗糖和总糖的测定
文章来源:《食品理化检测技术》
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