在此介绍使用过敌敌畏等二十种农药制剂的水果、蔬菜、谷类等作物的残留量测定(依据GB/T5009.20-2003第一法)。
1.原理
含有机磷的试样在富氢焰上燃烧，以HPO碎片的形式放射出526mm的特性光。这种光经滤光片选择后，有光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来。试样的峰面积或峰高与标准品的峰面积和峰高进行比较定量。
2.试剂
(1)丙酮。
(2)二氯甲烷。
(3)氯化钠。
(4)无水硫酸钠。
(5)助滤剂Celite545。
(6)农药标准品：敌敌畏(纯度≥99%)、速灭磷(顺式≥60%，反式≥40%)、久效磷(≥99%)、甲拌磷(≥98%)、巴胺磷(≥99%)、二嗪磷(≥98%)、乙密硫磷(≥97%)、甲基密啶磷(≥99%)、甲基对硫磷(≥99%)、稻瘟净(≥99%)、水胺硫磷(≥99%)、氧化喹硫磷(≥99%)、稻丰散(≥99.6%)、甲喹硫磷(≥99.6%)、克线磷(≥99.9%)、乙硫磷(≥95%)、乐果(≥99.0%)、喹硫磷(≥98.2%)、对硫磷(≥99.0%)、杀螺硫磷(≥98.5%)。
(7)农药标准溶液的配制：分别准确称取(6)中标准品，用二氯甲烷溶解，分别配成1.0mg/mL的标准储备液。贮于冰箱(4℃)中，使用时根据各农药品种在仪器上的响应情况，吸取不同量的标准储备液，用二氯甲烷稀释成混合标准使用液。
3.仪器
(1)气相色谱仪：附有火焰光度检测器(FPD)。
(2)组织捣碎机。
(3)粉碎机。
(4)旋转蒸发仪。
4.操作步骤
(1)试样制备
①取样：粮食试样经粉碎机粉碎，过20目筛制成粮食试样；水果、蔬菜试样去掉非可食部分制成待分析样。
②提取：称取试样(水果、蔬菜50.00g；谷物25.00g)，置于300mL烧杯中，加入50mL水和100mL丙酮(提取液总体积为150mL)，用组织捣碎机提取1～2min。匀浆液经铺有两层滤纸和约10g的助滤剂的布氏漏斗减压抽滤。取100mL滤液至500mL分液漏斗中。
③净化：向滤液中加入10～15g氯化钠使溶液饱和。猛烈振荡2～3min，静置10min，使丙酮和水相分层，水相用50mL二氯甲烷振摇2min，再静置分层。
④浓缩：将丙酮和二氯甲烷提取液合并经装有20～30g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水滤入250mL圆底烧瓶中，再以约40mL二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠，洗涤液也并入烧瓶中。用旋转蒸发仪浓缩至约2mL，浓缩液定量移至5～25mL容量瓶中，加二氯甲烷定容至刻度。
(2)气相色谱仪(FPD)测定
①色谱参考条件：
色谱柱：a.玻璃柱2.6m×3mm(i.d.)，填装涂有4.5% DC-200+2.5% OV-17的Chromosorb W AW DMCS(80～100目)的担体。
b.玻璃柱2.6m×3mm(i.d.)，填装涂有1.5%(质量分数)QF-1的 Chromosorb W AW DMCS(60～80目)
气体速度：氮气50ml/min、氢气100mL/min、空气50mL/min。
温度：柱温240℃，汽化室260℃，检测器270℃。
②色谱分析：吸收2～5uL混合标准使用液及试样净化液注入气相色谱仪，记录色谱峰的保留时间和峰高。以保留时间定性，以试样的峰高或峰面积与标准组分比较定量。
③色谱图：16种有机磷农药的色谱图，见图6-4；13种有机磷农药的色谱图，见图6-5。
5.结果计算
式中xi——试样中i组分有机磷农药的含量，mg/kg
Ai——试样中i组分的峰面积，积分单位
Asi——混合标准液中i组分的峰面积，积分单位
V1——试样提取液的总体积，mL
V2——净化用提取液的总体积，mL
V3——浓缩后的定容体积，mL
V4——进样体积，uL
m1—注入色谱仪中的i标准组分的质量，ng
m2——试样的质量，g
计算结果保留两位有效数字
图6-4 16种有机磷农药的色谱图
1—敌敌畏，最低检测浓度0.005mg/kg 2—速灭磷，最低检测浓度0.004mg/kg
3—久效磷，最低检测浓度0.014mg/kg 4—甲拌磷，最低检测浓度0.004mg/kg
5—巴胺磷，最低检测浓度0.011mg/kg 6—二嗪磷，最低检测浓度0.003mg/kg
7—乙嗜硫磷，最低检测浓度0.003mg/kg 8—甲基嘧啶磷，最低检测浓度0.004mg/k8
9—甲基对硫磷，最低检测浓度0.004mg/kg 10—稻癌净，最低检测浓度0.004mg/kg
11—水胺硫磷，最低检测浓度0.005mg/kg 12—氧化喹硫磷，最低检测浓度0.025mg/kg
13—稻丰散，最低检测浓度0.017mg/kg 14—甲喹硫磷，最低检测浓度0.014mg/kg
15—克线磷，最低检测浓度0.009mg/kg 16—乙硫磷，最低检测浓度0.014mg/kg
图6-5 13种有机磷农药的色谱图
1—敌敌畏 2—甲拌磷 3—二嗪磷 4—乙密硫磷 5—巴胺磷 6—甲基嘧啶磷7—异稻瘙净
8—乐果 9—硫磷 10—甲基对硫磷 11—杀螺硫磷 12—对硫磷 13—乙硫磷
文章来源：《食品理化检测技术》