介绍液相色谱-串联质谱的快速测定方法(依据GB/T19857-2005)。

1.原理

试样中的残留物用乙腈-乙酸铵缓冲溶液提取，乙腈再次提取后，液液分配到二氯甲烷层，经中性氧化铝和阳离子固相柱净化后用液相色谱-串联质谱法测定，内标法定量。样品中孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫和隐色结晶紫残留量按下式计算(计算结果需扣除空白值)：

式中X——样品中待测组分残留量，ug/kg

p——孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫或隐色结晶紫标准工作溶液的浓度，ug/L

p_si——标准工作溶液中内标物的浓度，ug/L

p_i——样液中内标物的浓度，pg/L

A_s——孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫或隐色结晶紫标准工作溶液的峰面积

A——样液中孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫或隐色结晶紫的峰面积

A_si—标准工作溶液中内标物的峰面积

A_i——样液中内标物的峰面积

V——样品定容体积，mL

m——样品称样量，g

2.液相色谱-串联质谱条件

色谱柱：C18柱，50mm×2.1mm(i.d.)，粒度3um；流动相：乙腈+5mmol/L乙酸铵=75+25(体积比)；流速：0.2mL/min；柱温：35℃；进样量：10uL；离子源：电喷雾ESI，正离子；扫描方式：多反应监测MRM。

雾化气、窗帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气，使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求。

喷雾电压、去集簇电压、碰撞能等电压值应优化至最优灵敏度。

监测离子对：孔雀石绿m/z329/313(定量离子)、329/208；隐色孔雀石绿m/z331/316(定量离子)、331/239；结晶紫m/z372/356(定量离子)、372/251；隐色结晶紫m/z374/359(定量离子)、374/238；氟代孔雀石绿m/z334/318(定量离子)；氟代隐色孔雀石绿m/z337/322(定量离子)。

3.要点提示

(1)本方法适用于鲜活水产品及其制品中孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿、结晶紫及其代谢物隐色结晶紫残留量的检验。

(2)本方法孔雀石绿的残留量测定结果系指孔雀石绿和它的代谢物隐色孔雀石绿残留量之和，以孔雀石绿表示；结晶紫的残留量测定结果系指结晶紫和它的代谢物隐色结晶紫残留量之和，以结晶紫表示。

(3)方法检测限：孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫、隐色结晶紫的检测限均为0.5ug/kg。

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文章来源：《食品理化检测技术》