Nucleofector 技术是Lonza 公司的专利创新技术,它综合应用传统的电穿 孔技术及细胞特异性细胞核转染液,通过调整优化的电转参数(内存转染程序), 直接把外源基因导入原代细胞及细胞系的细胞浆和细胞核中。它不同于传统的电 穿孔仪,因为它可以把外源基因直接导入核中,而且细胞存活率远远高于电穿孔 仪。
Lonza 核转染技术的优势与操作
Nucleofector技术是独一无二的,因为它可以直接将DNA 转染到细胞核 内,因此实现了因受到细胞分裂限制而一直困扰人们的原代细胞的高效率转染。 在Nucleofector 核酸转染仪的帮助下,您可以在肿瘤研究、免疫学、组织工程 学及心血管疾病研究领域中轻而易举地获得大于90%的高效率基因转染率。 Nucleofector 核酸转染技术特别适用于转染原代细胞和难以转染的细胞系,如 T 细胞及PC-12 细胞系等。
Nucleofector 试剂盒包含两个溶液:Nucleofector 溶液和添加剂。两者都 是针对每个细胞类型来特异开发的。它们在核转染过程中提供了细胞友好的环境,支持DNA 直接到达细胞核。Nucleofector 溶液只与Nucleofector 装置共 同使用时,才能发挥作用。
Nucleofector 细胞转染技术的优势:
1.不依赖细胞的有丝分裂,适用于悬浮细胞、原代细胞等难转染细胞。
2. 高转染效率,直接将外源基因转入核内。
在某些细胞中Nucleofector 的转染效率可以达到90%,与病毒感染同样有 效。Nucleofector 直接将DNA 运送到细胞核中,因此,基因表达就可以立即 开始,数小时内就可以完成转染和分析的全过程,对于细胞系来说2-6 小时就可 以分析,对于原代细胞则需要4-16 小时。
3.可转染DNA、RNA 或siRNA。
4.操作简单方便,Nucleofector 转染技术操作不到1 小时就能完成。
5.最广泛细胞类型,全球共享的细胞转染数据库不断扩大。目前已有1200 余种细胞系高效转染,130 余种原代细胞成功转染。
6.维持细胞生理功能。
Nucleofector 细胞核转染技术整个操作过程只需四步,非常简单、高效。
第1 步:处理细胞,精确计数
第2 步:混合DNA、转染液,重悬细胞,加入转染杯
第3 步:将转染杯放入转染仪,按键选择相应程序,按"start"键开始转染, 10 秒钟左右
第4步:取出细胞继续培养