一、开机关机步骤

       下面以Renishaw公司的inVia型激光共焦拉曼光谱仪为例描述仪器的正常开、关机和操作过程。

       RenishawinVia型激光共焦拉曼光谱仪操作规程

       (1)开机顺序

       ①打开主机电源；

       ②打开计算机电源；

       ③打开将使用的激光器电源

       a．514nm：打开激光器后面的总电源开关然后打开激光器上的钥匙；

       b．785nm：直接打开激光器电源开关。

       (2)自检

       ①用鼠标双击wiRE2．0图标，进入仪器工作软件界面；

       ②系统自检画面出现，选择“Reference All Motors”并确定(OK)，系统将检验所有的电机。

       ③从主菜单Measurement→New→NewAcquisition设置实验条件，静态取谱(Static)，中心RamanShift520cm-1，Advanced→Pinhole设为in；

       ④使用硅片，用50倍物镜、1s曝光时间、100％激光功率取谱，使用曲线拟合(Curvefit)命令检查峰位。

       参数获得：

       a．光谱画面上点击鼠标右键，执行弹出菜单中的Curvefit命令，进入曲线拟合画面；

       b．在光谱上再次点击鼠标右键，选中弹出菜单中的第一项AddCurves；

       c．在将要拟合的谱峰顶点点击鼠标左键，出现一条曲线；

       d．点击鼠标右键，执行弹出菜单中的Startfit命令，在下面的表格中可看到拟合得到的数据；

       e．硅峰应该在RamanShift520cm-1处，若拟合数据中的峰位(PeakPosition)偏离520cm-1，执行主菜单Tools—Calmration—offset命令；

       f．用Curvefit得到的峰位值减去520cm，将得到的数值添到Offset数值框中并确定；

       g．重新取谱，若偏离520cm叫超过±0．5cm-1，重复上述步骤。

       (3)实验

       ①实验条件设置

        a．点击设置按钮(或者菜单中Measurement→SetupMeasurement)，检查(设置)下列参数

        Range：Static静态、Extended连续扫描；

        Center(Low、High)：设置主峰中心位置(Static)或扫描范围(Extended)；

        Grating：光栅，1800线/mm对应514nm；1200线／mm对应780nm；

        Laser：选择激发光源；

        Units：横坐标的单位，可以是纳米nm，拉曼位移cm-1，绝对波数Abs．cm-1，电子伏特eV；

        Confoeality：设置共焦程度，有常规和高共焦设置两种选择；

        在Acquisition界面设置曝光时间的累积次数、激光功率；

        在Advanced界面中设置是否使用针孔，选In为使用，Out不使用。

        b．OK：采用当前设置条件，并关闭设置窗口；Apply：应用当前设置条件，不关闭窗口。

       ②采集谱图执行Measurement→Run命令。

       (4)关机

       ①关闭计算机

        a．关闭WiRE2．0软件；

        b．Start→ShutDown→Turnoffcomputer，计算机将自动关闭电源。

        ②关闭主机电源。

        ③关闭激光器

        a．关闭钥匙；

        b．514nm激光器散热风扇会继续运转，动停转后再关闭主电源开关；

       (5)注意事项

       ①开机顺序主机在前，计算机在后。

       ②关机顺序计算机在前，主机在后。514nm激光器要充分冷却后才能关闭主电源。

       ③自检一定要等自检完成再做其它动作。不能取消(Cancel)。

       ④硅片514nm，自然解理线与横向成45°时信号最强。785nm(633nm，325nm)自然解理线与横向基本平行时信号最强。

       二、工作参数条件的选择

       当开始进行样品测试时，需注意选择正确的工作参数和条件。激光器的功率要随不同测试样品而改变，对固体或液体等不易分解的可用较强功率激发，生物样品等应选较低功率激发。积分时间可在开始时选择10s一次，正式测量时可根据信噪比的情况而定，信噪比高的积分时间可稍短，反之可采用较长时间积分。狭缝宽度的选择可根据所测光谱是否需要高分辨或高共焦模式来决定大小。

       为保证给出最佳的拉曼光谱图，可在光路调校好之后用快速扫描模式进行一次预扫描，然后根据测定要求和预扫描情况设定扫描范围、步长、积分时间、狭缝宽度、激发功率和扫描次数等进行正式测定。若样品易于光解，除降低激光功率外，还可更换测试点实施分段扫描。完成测试后，应在显微镜下检查样品足否已经损伤(光解、热解、脱落或变性等)。