应用方法
KFS141 神经元红色荧光探针说明书
2019-08-20 13:51  浏览:345  下载:20
文件类型:PDF文档
文件大小:104.06K
       神经元红色荧光探针 NeuroRed

  Catnumber:KFS141

  Storeat-20℃for6months,避光

  ForResearchUseonly

  一、产品描述

  神经元红色荧光探针NeuroRed(MW:933.88)是一种长链二烷基羰花青化合物,广泛应用于固定和非固定的组织与细胞中,进行顺行或逆行的神经示踪分析。探针不会影响细胞的活力、生长以及基本生理特性。其标记的运动神经元,可在培养基条件下持续跟踪长达四周,在体内长达一年。染料通过在质膜中的缓慢横向扩散均匀标记神经元,0.2~0.6mm/每天/固定标本,在活体组织里,可以达到6mm/每天。经过醛固定的组织,探针在组织内的标记扩增可以持续长达1~2年。一般情况下未标记的染料不会向非标记的细胞转移,除非质膜被破坏,比如切片部位。

       二、产品包装

 

组份

KFS141

储存条件

神经元红色荧光探针 NeuroRed

10mg

-20℃,避光

  
       三、操作说明

  制备储液

  固体染料以DMF或者DMSO或乙醇溶解配制为1mM的储液。一旦制备为储液需密封避光冷冻保存,保存期6个月。

  标记悬浮细胞

  1.1 以无血清培养基悬浮细胞密度为1X106个/mL。

  1.2 每1mL细胞悬液加入5μL细胞标记液,混匀。

  1.3 于37度孵育1~20分钟。不同的细胞类型所用的孵育条件不一样,可参考表格1.初始孵育时间可选择20分钟,随后再进行优化。

  1.4 于37度,1500rpm5分钟离心标记悬浮液。

  1.5 去上清,用37度的培养基轻轻悬浮细胞。

  1.6 重复两次以上的洗涤步骤。

  1.7 放置10分钟后进行荧光测量。

  标记贴壁细胞

  2.1 培养细胞至所需的汇合度。

  2.2 取出爬片,吸去培养基,放到盖玻片湿盒中。

  2.3 准备标记,每1mL新鲜培养基中加入5μL的标记液。

  2.4 吸取100μL盖玻片周围的染色介质,轻轻铺匀,使之盖满整个爬片。

  2.5 于37度孵育细胞,不同的细胞类型所用的孵育条件不一样,可参考表格1.初始孵育时间可选择20分钟,随后再进行优化。

  2.6 去掉染色介质,用新鲜预热的培养基孵育10分钟,再更换以新的预热的培养基孵育10分钟,重复洗涤盖玻片三次。

                                             表 1. 探针光谱特性

Tracer

Ex (nm)

Em (nm)

Optical Filters

Omega

Chroma

NeuroRed

549

565

XF32

31002