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产品编号：BTN51210
规格：20L/50L
产品及特点：
SuperBuffer-2 是百奥莱博在SuperBuffer 基础上开发的DNA/RNA 两用快速电泳液。它跟SuperBuffer 一样，能以高达30 V/cm 的电压电泳，达到快速电泳的目的。跟SuperBuffer 不同的是，本产品对盐离子浓度敏感度低，同时还能用于RNA 电泳。其主要优点是:
1. 快速，电泳时间短, 对分辨率要求不高的电泳（如PCR 和酶切检测等）甚至可以在5-10 分钟内完成。
2. 不影响后续的Southern 杂交，DNA 胶回收和DNA 连接等反应。
3. 价格与TBE(干粉)相当甚至更便宜。
4. DNA 胶回收率高于使用TAE 和TBE 电泳的胶回收。
规格及成分：
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成分 |
20L |
50L |
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SuperBuffer-2 |
70g |
180g |
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说明书 |
1份 |
1份 |
保存条件：
常温保存和运输，有效期两年。
自备试剂：
蒸馏水。
使用方法：
一：溶液的配制
将本产品全部加到一个干净的容量适当的容器中，按下表的用量加入蒸馏水并在室温下用磁力搅拌器搅拌，直到干粉完全溶解(一般需要30 分钟左右)。
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20 L干粉 |
50 L干粉 |
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配法一(配制20X 浓缩液) |
加水1 升得到20×浓缩液 |
加2.5 升得到20×工作液 |
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配法二(直接配制工作液) |
加水20 升得到1×工作液 |
加水50 升得到50×工作液 |
注：其他浓度的浓缩液配制可以按比例计算，但浓缩液浓度不能超过20×，否则干粉不能全部溶解。由于干粉含多种未彻底混合均匀的成份，所以必须一次性全部用于溶液的配制。如果缓冲液(浓缩液或工作液)长时间不用，zui好灭菌后放4℃长期保存。
二: DNA 电泳
将SuperBuffer-2 浓缩液用蒸馏水稀释到1×，除了需要使用较高电压才能得到快速的电泳结果外，操作跟使用TAE 和TBE 基本一样。需注意的地方是：
1. 电压：在SuperBuffer-2 溶液中既可以使用常规电压，也可以使用较高电压，只是使用常规电压时，其快速的优越性就体现不出来。使用较高电压时，由于各电泳槽结构不同，zui佳电压需要稍做摸索。一次zui好将工作电压调到zui高电压的80%左右，即平均25 V/cm（电极距离）。对一般minigel，一般可以用250-350V 跑5-10 分钟；对大的电泳槽，可用400-450V 跑5-10 分钟。每次根据电泳结果和缓冲液温度决定各电泳槽的zui佳工作电压和时间。一般电压越高，电泳时间越短。若在电泳时发生电流或电压逐渐下降的现象，请检查电泳仪是否设置了电流上限或功率上限。缓冲液电泳次数超过3 次或缓冲液中有细菌/真菌生长也会出现此现象，需要更换新的缓冲液。
2. 胶浓度：建议将琼脂糖凝胶的浓度控制在0.8%左右，对于长度在100 bp 以下的DNA 片段，可以将琼脂糖凝胶的浓度提高到1.2%左右。由于每次溶胶过程中会丢失水份，所以zui好在溶胶后适当补充水份（可以前后称重），否则胶浓度会逐渐增加，DNA 的移动速度会减低、产热会增加。使用0.8%左右的琼脂糖凝胶的好处是一方面可以节约胶的用量，另一方面可以使DNA的泳动速度更快，同时还能够提高DNA 的回收率。
3. 染色：如果使用EB，zui好把染料加入到融化后的凝胶中（只是EB 的终浓度zui好为0.4 -0.5μg/mL，比使用TAE 和TBE 时稍高），但也可以加入到电泳缓冲液中或/和电泳上样液中。如果使用百奥莱博低毒染料绿如蓝，zui好将染料加入到融化后的凝胶中。如果只有胶中有染料，则长时间电泳后（超过20 分钟），大部分染料在高压下会与DNA 分离，DNA 条带可能会看不见或看起来很淡，此时应该再染色一次。在染色液中加入一定的量的NaCl（终浓度≥0.05 mol/L）能提高染色效果。SuperBuffer-2 与SYBR Green I 也有良好的兼容性，可以结合使用。
4. DNA 条带扭曲：DNA 样品中所含SDS 量过高时（SDS 主要来于上样液）， DNA条带将出现扭曲，影响实验效果。建议使用不含SDS 的上样液。
5. 反复使用：1×SuperBuffer-2 电泳液至少可以重复使用2-3 次，如果使用大电泳槽，可以重复使用的次数会更多。
6. TAE 和TBE 胶：已经用TAE 和TBE 电泳液配置好的琼脂糖凝胶可以直接放入1× SuperBuffer-2 电泳液中按上述电泳条件电泳，但有时候会有扭曲现象。
三：RNA 电泳
跟DNA 电泳一样，必须在使用前用水将SuperBuffer-2 溶液稀释到1×，其使用方法跟DNA 电泳的主要区别是：
1. 电压：RNA 电泳时，zui高使用电压大约只有DNA zui高使用电压的一半左右，所以一般minigel 可以使用150 V 左右的电压。由于各实验室电泳槽规格各异，一次电泳时，zui好将工作电压调到跟MOPS 电泳一样的电压，每次再逐渐往上调电压和时间，根据电泳结果和测定缓冲液的温度决定今后的工作电压。
2. RNA 上样液：RNA 必须与含变性剂的RNA 上样液混合，并在80℃保温10 分钟后冰浴2-5 分钟再上样。不能直接将RNA 样品上样或使用DNA 上样液，否则电泳不但很难得到清晰的条带，并且在加样孔中还会有看似DNA 污染的条带出现。推荐使用百奥莱博生产的RNA 变性/上样/染色三合一即用型溶液RNAON。
3. 胶浓度：RNA 电泳zui好使用1%-1.5%的琼脂糖凝胶，用1X SuperBuffer-2配制。
4. 染色：同DNA 电泳。