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产品编号:BTN61204
规格:10T
产品及特点:
本产品原名叫一步式PAGE 染色,是目前zui简单、zui灵敏的基于考马斯亮蓝的PAGE 胶蛋白质染色产品,完全可以取代zui常用的Coomassie Brilliant Blue G-250 PAGE 染色。它具有下列特点:
1. 一步式操作。将漂洗后的PAGE 胶放入染色液中后即可不管,无固定和脱色步骤,zui快10 分钟即可见条带(对ng 级别的样品需要过夜)。
2. 高灵敏度。灵敏度跟银染,SYPRO Ruby 和Deep Purple 等相当,达到纳克水平。
3. 肉眼即可观察结果,而SYPRO Ruby 和Deep Purple 等纳克级染料需要贵重的检测仪器。
4. 与质谱等后续分析方法兼容。
5. 健康环保。不使用乙酸和甲醇等有刺激性和毒性的试剂。
6. 可以用于任何PAGE 胶的蛋白检测,包括SDS-PAGE 和2D胶。
7. 即开即用,足够至少10次minigel 染色。
规格及成分:
成分 |
规格 |
绿如蓝一步式蛋白PAGE染液 |
250ml |
说明书 |
1份 |
保存条件:
常温运输和保存、有效期半年。
自备试剂:
Milli-Q水
使用方法:
一: 洗涤(此步十分重要,否则PAGE 胶中残留的SDS 等物质会严重干扰后续染色)
如果蛋白质不用于后续的质谱分析,可以采用下面的快速漂洗法
1. 电泳结束后,小心将PAGE 胶转移到装有100 mL Milli-Q 水的容器中。
2. 微波30 秒钟左右(到还没沸腾为止)。
3. 在台式脱色摇床上室温摇晃3-5分钟后倒掉Milli-Q 水。
4. 再重复第1-3 步两次后直接进入第8 步操作。
如果蛋白质要用于后续的质谱分析,可以采用下面的温和漂洗法
5. 电泳结束后,小心将胶转移到装有100 mL Milli-Q 水的容器中。
6. 在台式脱色摇床上室温摇晃10 分钟后倒掉Milli-Q 水(不能缩短时间)。
7. 再重复上面的漂洗步骤两次后进入第8 步操作。
二:染色
8. 加入足够的本产品到装有PAGE 胶的容器中,加入得量以覆盖PAGE 胶为zui低要求,一块minigel 一般需要10-20 mL 本产品。注意:本产品用前需要充分摇晃半分钟,其正常颜色为深蓝绿色,含颗粒状物。
9. 在台式脱色摇床上室温摇晃染色直到PAGE 胶上出现满意条带为止。对ug 级的蛋白样品(注:此处指每条带的量,不是总蛋白量。下同),一般10分钟即可见到条带,2 小时染色即可完成;但对ng 级的蛋白样品,一般需要进行过夜染色。
10. 本方法染色背景很低,可以不需要脱色,直接用Milli-Q 水漂洗PAGE胶2 次,每次3 分钟。洗涤可以使背景变得更干净,也可以洗去PAGE胶表面的颗粒状物。但如果需要背景更干净,用户也可以用自备的脱色液脱色10-60 分钟。配制20 mL 脱色液的方法是:将2 mL 无水乙醇,0.5 mL 磷酸(浓度为85%左右)和17.5 mL Milli-Q 水混匀后即可。
11. 拍照保留染色结果,其余后续处理按相关操作进行。
12. 一般不建议重复使用用过的本产品。但如果短期内重复使用2-3次,灵敏度也比常规的考染高,只是染色到满意条带出现需要更长的时间。