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产品编号:BTN70104
规格:100ml
产品及特点:
本产品可以对已经转移到印迹膜上的DNA 和RNA 进行快速染色,在不需要UV 等仪器条件下确认转膜效果。可以用于Southern、Nothern 和碱变性胶印迹膜。它具有下列特点:
1. 环保,来于一种常用的灭菌剂。
2. 快速方便,5-10 染色即可直接照相保存或扫描保存。
3. 可逆,可被预杂交液中的SDS 洗脱,不影响后续杂交反应。
4. 灵敏度为20 ng/条带(包括DNA 和RNA),跟EB 相当。
5. 跟各种印迹膜兼容,可用于Gene-Screen、BioTrace RP、Zeta-Probe、Nytran、Hybond、Duralon 等尼龙膜,也可用于PVDF 膜和硝酸素膜时背景稍高)。
6. 可以反复使用。
规格及成分:
成分 |
规格 |
核酸印迹膜染液 |
100ml |
说明书 |
1份 |
保存条件:
常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂:
去离子水、1×SSPE 或1×SSC 溶液。
使用方法:
1. 按常用的印迹法、电转法等方法将电泳胶中的DNA 或RNA 转移到印迹膜上并根据印迹膜的性质进行UV 交联或加热烘烤,将核酸固定。
2. 如果是RNA 甲醛变性胶的印迹膜,zui好用去离子水洗涤印迹膜30秒钟以除去甲醛(甲醛会干扰染色)
3. 将湿润的印迹膜浸入到装有足够印迹膜染液(本产品)的容器中。如果印迹膜很干,则需要先用1×SSPE 或1×SSC 溶液湿润。
4. 室温下轻柔摇晃染色5-10分钟。印迹膜上DNA或RNA量大时染色时间可能不需要5分钟,染色时间过长背景会增加。
5. 将染液倒回到试剂瓶中以备下次使用。
6. 用自备的去离子水清洗印迹膜三次,每次5-10秒。DNA 或RNA 条带将呈现蓝色,背景将呈现淡蓝色。注意:洗涤时间不要太长,否则固定在印迹膜上的核酸在低盐条件下(在去离子水中)容易脱落。
7. 用滤纸吸去多余的水份,此时可以用铅笔在印迹膜上作标记(Southern杂交膜可以标记DNA 分子量标准的位置,Northern 杂交膜可以标记18S 和28S RNA 的位置,它们分别对应于2 Kb 和5 Kb 的大小),也可以将印迹膜放在白色背景下照相(zui好使用黄色滤光片)或者扫描以保存实验结果。
8. 如果预杂交液中有SDS,则印迹膜不需要脱色,可以直接用于预杂交。
如果预杂交液中不含SDS,需将染色后的印迹膜浸入到含1% SDS 的1×SSPE 或1×SSC 溶液中在室温下摇晃直到颜色脱去,一般需要15分钟。