应用方法
BTN70801 非酶DNA清除剂-2说明书
2019-08-09 11:19  浏览:230  下载:9
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BTN70801 非酶DNA清除剂-2说明书

产品编号:BTN70801

规格:15T

产品及特点:

Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前zui常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。我司基因开发的非酶DNA清除剂-2不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有操作快速,稳定性好和性价比高等诸多优点,完全可以替代价格昂贵的RNase-free DNase。

1. 高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降上百倍(根据PCR检测)而RNA分子完整性不会受到任何影响。

2. 本身不含RNase污染,因为本产品为非酶产品;而在制备RNase-free DNase时,为避免DNase失活,处理条件往往比较温和,所以终产品中往往残留有RNase污染。

3. 快速,只需要十多分钟。

4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。

5. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。

6. 能用于小RNA 中DNA污染的去除。

规格及成分:

成分

规格

溶液A

1.5ml

溶液B

3ml

说明书

1份

保存条件:

常温运输、4℃保存,有效期一年。

自备试剂:

氯fang、75%乙醇

使用方法:

1. 将总RNA 溶液与溶液A 按1:1的比例混合(即100 μL RNA 溶液需加100μL DNA Erasol-2),充分震荡半分钟。注意:RNA溶液中盐(如钠离子)的浓度不能高于0.2 M,如果RNA 溶液的量不足100μL,zui好加无RNase水补足到100μL以便后续操作,如果体积大于100μL,试剂的用量也需要按比例增加。

2. 加入相当于RNA 溶液和DNA Erasol-2 混合液总体积1/2 的自备氯fang,充分震荡半分钟。

3. 12000-15000 g 室温或4℃离心1-3 分钟。

4. 转移上清到一个RNase-free 的塑料离心管中,加2 倍体积的溶液B(用前摇匀),充分震荡半分钟。

5. 12000-15000 g 室温或4℃离心10 分钟后,小心弃上清。如果处理的样品中含有小RNA,zui好使用30 分钟的离心时间。

6. 加1 mL 自备75%乙醇,充分震荡半分钟。

7. 12000-15000 g 室温或4℃离心5 分钟后小心弃上清。

8. 短暂快速离心,小心吸弃余液。

9. 加入自备RNase-free 水溶解RNA 沉淀后立即使用或放-80℃长期保存。

疑难解答:

Q:能否用本产品对同一样品进行反复处理?

A:可以。

Q:为何处理后的RNA 还有DNA 条带?

A:有些时候(尤其是使用非变性电泳检测时)RNA 会形成聚合物,电泳很慢,人们会误以为是DNA,可以加少量无DNase 的RNase 处理样品,确认就是DNA。

如果是,可能是样品中盐浓度过高使DNA 去除效率降低,可以预先用乙醇沉淀法去掉盐离子。

Q:本产品跟DNA Erasol(BTN60201) 有何区别?

A:前者可以用于小RNA(长度小于200nt)的RNA 样品而后者不能。