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时间温度梯度凝胶电泳系统采用变性梯度凝胶电泳系统的原理但不使用化学变性剂梯度,操作更简单、快速并便于重
复。DNA 上样于含尿素的聚丙烯酰胺凝胶。电泳过程中逐步、均一地升高温度,从而在电泳运行过程中产生一个线性
的温度梯度,变性环境由凝胶中均一的尿素浓度加上时间温度梯度形成。
原理:
双链 DNA 分子在一般的聚丙烯酰胺凝胶电泳时,其迁移行为决定于其分子大小和电荷。不同长度的 DNA 片段能够被
区分开,但同样长度的 DNA 片段在胶中的迁移行为一样,因此不能被区分。TTGE 时间温度梯度凝胶电泳技术在一般
的聚丙烯酰胺凝胶基础上,加入了尿素和甲酰胺梯度或是温度梯度,从而能够把同样长度但序列不同的 DNA 片段区分
开来。一个特定的 DNA 片段有其特有的序列组成,其序列组成决定了其解链区域(melting domain, MD)和解链行为
(melting behavior) 。一个几百个碱基对的 DNA 片段一般有几个解链区域,每个解链区域有一段连续的碱基对组
成。当温度逐渐升高达到其zui低的解链区域温度时,该区域这一段连续的碱基对发生解链,当温度再升高依次达到各
其他解链区域。
应用领域:
时间温度梯度凝胶电泳系统技术在微生物生态学中的一个主要用途是分析微生物群落结构组成,该技术被广泛应用于
各微生物生态系统,包括土壤、活性污泥、人体和动物肠道、温泉、植物根系、海洋、淡水湖、油藏等。绝大部分研
究都是通过扩增细菌或古细菌的16S rRNA 基因来研究各生态系统中的细菌或古细菌群落多样性。也有用真菌的通用引
物扩增 18S rRNA 基因,从而研究真菌的群落多样性温度控制器与加热器可使温度缓慢地以0.1°C/hr 的速度上升
无需化学梯度,电泳时间由16小时缩短为5-8小时,使设置和制胶更方便
对照试剂与已证明有效的规程使你可以立即开展实验
全中文液晶显示,微电脑智能控制,具有过压、过流、过载和报警等装置
系统可对温度、时间等信息进行实时监控,开盖自动切断电源
分辨率高,温度梯度由微处理器控制,线性ji为严格
节约时间,小面积温度梯度板和小尺寸凝胶,只需要少量的凝胶溶液
加样品量小,1~5mg的DNA或RNA上样品量即可达到清晰的电泳分离效果
重现性好,电泳条件(如温度、时间等)易于控制,可以保证电泳的重现性和结果的重复性
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