为了应对《中国药典》2015版的实施，根据《中国药典》2015版2341款第四法的要求，本文建立了一种运用三重四极杆气质联用仪（GC-MS/MS）来检测药材、饮片及制剂中部分农药残留量的分析方法。试样加无水硫酸镁、无水乙酸钠后，用乙腈提取，提取液经净化后，氮吹仪浓缩，用乙腈定容。在毛细管气相色谱柱上分离，采用GC-MS/MS测定，用内标法定量计算。各化合物按照浓度5.0、10.0、25.0、50.0、100.0 µg/L建立标准曲线，74种农药组分在5.0~100.0 µg/L浓度范围内线性关系良好，线性相关系数均大于0.99。按照IUPAC（国际理论（化学）与应用化学联合会）方法规定计算各组分检出限，各组分检出限在0.01–2.15 µg/L之间。结果表明，应用赛默飞世尔科技TSQ8000 Evo完全可以应对2015版《中国药典》关于GC-MS/MS检测药材、饮片及制剂中部分农药残留量的要求。

       随着对药材农药残留的报道日益增多，人们对农药残留危害的认识也越来越深入，药典对其制定检测方法也越来越全面，越来越科学。《中国药典》2000年版首次规定了9种有机氯农药残留的检测方法，之后在2005年版的药典中，除甘草、黄芪等药材外，对其余药材均未提出限量要求。2010版《中国药典》中不仅规定了9种有机氯农药残留的检测方法，而且规定了12种有机磷类的检测方法，还规定了3种拟除虫菊酯农药残留量的检测方法，然而在限量标准方面仅规定了甘草和黄芪两种药物的六六六、滴滴涕、五氯硝基苯的限量标准，其它中药材尚未涉及。最新的2015版《中国药典》对农残检测进一步作出了详细规定，并首次规定了用GC-MS/MS和LC-MS/MS等技术用于药材中农残检测。历版《中国药典》对药材农药残留量部分主要变化如表1所示：

表1.历版《中国药典》对药材农药残留量部分主要变化

【实验/设备条件】

仪器方法

气相方法：

柱温箱：60 ºC保持1 min，以30 ºC/min升至180 ºC，再以10 ºC/min升至300 ºC，保持5 min。

进样口：不分流进样，不分流时间：1.5 min；

进样口温度：270 ºC；载气：恒流，1.2 mL/min；

传输线：280 ºC

质谱方法：离子源温度为300 ºC，采用T-SRM方法，具体检测离子对如表2所示：

表2. 76种农药对照品、监测离子对、碰撞电压（CE）

【实验/操作方法】

样品前处理

1）样品提取：取供试样品（药材或饮片）粉碎成粉末，称取3 g样品到50 mL离心管中，加入5 mL 1%乙酸溶液，涡旋使样品充分浸润、静置。再加入10 mL乙腈震荡混匀，加入4 g MgSO4、1 g CHCOONa，在涡旋振荡器上振荡2min，冰浴中放置冷却5 min，然后在5000 rpm转速下离心5 min。

2）样品.净化：取上清液8 mL，转移到15 mL净化管，净化管中包括900 mg MgSO、300 mg PSA、300 mg C18、石

墨化炭黑90 mg。旋涡震荡样品1 min，然后在5000 rpm转速下离心5 min。准确取上清液5 mL，N2吹仪上于40℃

水浴吹干，乙腈定容至1 mL，直接GC-MS/MS分析。

样品基质溶液

按照上述程序处理药材样品，得到空白样品的基质溶液。

标准溶液的配置

1）标准储备液：在十万分之一分析天平上称取每种农药单标化合物10 mg，加入10 mL相应的溶剂（根据不同的化合物加入丙酮、甲苯或者乙腈）溶解，配制成浓度为约1000 mg/L的溶液。每种单个标准储备液的浓度根据称样量和加入溶剂的体积计算得到。所有单标储备液在-20℃冰箱中冷冻保存。单标储备液的有效期为6个月。

2）混合标准中间液：移取适量的单标储备液，用乙腈稀释。中间标准储备液的浓度为10.0 mg/mL。中间标准储备液在

-20℃冰箱中冷冻保存。中间储备液的有效期为3个月。

3）工作标准溶液：取适量的混合标准中间液，以上述空白样品基质液依次稀释成浓度为5.0、10.0、25.0、50.0、100.0工作标准溶液。

【实验结果/结论】

色谱分离结果

每个化合物SRM质谱条件（母离子-子离子-碰撞能量）从TraceFinder的CDB中导出（见表2），在该条件下运行样品可得到目标物的SRM总离子流图见图1。

图1.标准溶液总离子流色谱图（100 µg/L）

标准曲线线性、检出限及精密度

配置混合标准溶液，各浓度分别为：5.0、10.0、25.0、50.0、100.0 µg/L采用上述方法分别进样分析，考察各组分的线性。实验结果表明74种农药组分在5.0~100.0 µg/L线性关系良好，线性相关系数均大于0.99,对同一样品连续进样6针，RSD在0.37%–4.91%之间，重复性良好。按照IUPAC方法规定计算各组分检出限，各组分检出限在0.01–2.15 µg/L之间，根据本应用方法的前处理，其检出限都满足最新药典对于农残分析检出限的要求（见表3）。

表3.药材中74种农残的线性方程及检出限

结论

本文参考药典前处理方法，建立了气相串联质谱法（GC-MS/MS）测定药材中的74项农残，样品前处理只需要45 min即可完成，经快速前处理后，在TSQ 8000 Evo三重四极杆仪器上，通过一针分析，在25 min内完成分离和检测。以快速的前处理结合赛默飞的TSQ 8000 Evo高通量、高灵敏度的三重四极杆仪器，为药材的农残分析带来高效、准确、方便易用的解决方案。

【仪器/耗材清单】

质谱仪器：TSQ 8000 Evo质谱仪（赛默飞世尔科技，美国）；

气相色谱仪：Trace1310 GC配AI l310自动进样器（赛默飞世尔科技，美国）；

色谱柱：TR-Pesticide II  30 m*0.25 mm*0.25 µm毛细管色谱柱（赛默飞世尔科技，美国）；

试剂：甲苯、丙酮、乙腈，均为色谱纯；