全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整治领导小组指定检验方法
1.离子色谱法测定牛奶中硫氰酸根
1.离子色谱法测定牛奶中硫氰酸根
1牛奶中硫氰酸钠测试原理
液态奶样品沉淀蛋白、去除脂肪后，用离子色谱分析，电导检测器检测，外标法定量。
2牛奶中硫氰酸钠实验部分
2.1牛奶中硫氰酸钠测试试剂与材料
2.1.1试验用水均为超纯水
2.1.2乙腈（色谱纯）
2.1.3固相萃取小柱：OnGuardRP柱（2.5cc），或相当者（如C18），使用前依次用5ml甲醇和10ml水活化。
2.1.4硫氰酸标准品
2.1.5硫氰酸标准储备液
将硫氰酸标准品于80度烘箱内烘干2小时。准确称取干燥后的硫氰化钾1.6732g于1000ml容量瓶中，定容，混匀。即得1000ppm硫氰根标准储备液。
2.1.6硫氰酸标准中间液
取硫氰酸标准储备溶液1mL，置于100mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含硫氰酸10mg/L。
2.1.7硫氰酸标准使用液
移取0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mL硫氰酸标准中间液，用水定容于10mL容量瓶中，浓度分别为0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mg/L。
2.2牛奶中硫氰酸钠测试仪器
2.2.1离子色谱仪：配备淋洗液发生器和电导检测器；
2.2.2离心机：冷冻离心机。
2.3牛奶中硫氰酸钠测试样品处理
取4mL液体奶样品，加入5mL乙腈沉淀蛋白，取上清液稀释10倍，过RP柱（或经冷冻离心机）去除脂肪后上机。
2.4牛奶中硫氰酸钠测试离子色谱参考条件
色谱柱：强亲水性阴离子交换柱。IonPacAS16，4.0×250mm分析柱；IonPacAG16，4.0×50mm保护柱；或其他相当者。
流动相：KOH溶液，梯度淋洗。淋洗液由淋洗液在线发生器在线产生。
KOH梯度程序如下：
时间（min）KOH浓度（mmol）
045
1345
13.170
1870
18.145
2345
流速：1.0mL/min；
抑制器：ASRS-300型抑制器，4mm；
抑制器抑制模式：外接水模式，抑制电流175mA；
柱温：30℃；
进样体积：100μL。
3牛奶中硫氰酸钠测试结果计算
X=c*9*10/4…………………………（1）
式中：
X——液态奶中硫氰酸的含量，单位为微克每毫升（μg/mL）；
c——由标准曲线得到试样溶液中硫氰酸的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；
9——液态奶的体积与乙腈体积之和，单位为毫升（mL）；
4——液态奶的体积，单位为毫升（mL）；
10——稀释倍数；
计算结果保留两位有效数字。
4牛奶中硫氰酸钠测试精密度
在重复性条件下，获得的硫氰酸的两次独立测试结果的绝对差值不大于其算术平均值的5%。