差速离心法是利用样品中各种组分的沉降系数不同而进行分离的方法，又称差分离心或差级离心。通常两个组分的沉降系数差在10倍以上时可以用此法分离。例如某样品中有大、中、小三个组分，用差速离心法分离时，把样品放在离心管内，先按大组分的沉降系数选择离心转速和离心时间，当离心结束时正好使大组分全部沉降到离心管底部，这时中小组分中的一部分也会沉降到底部。若原始样品液中三个组分的含量相等，则在原始样品液中大组分占总组分量的三分之一。通过一次离心后分离出的大组分沉淀占总组分量约90%。如要进一步提纯可以把此沉淀物再溶解，再按大组分的沉降条件离心，得到大组分的第二次离心沉淀。通过多次对沉淀和上清液差速离心，可以把三个沉降系数有差别的组份分离提纯，所以这个方法又称为分步离心法。