着色剂又称食用色素,是能使食品着色和改善食品色泽的一类食品添加剂。按其来源可分为食用天然色素和食用合成色素两类。天然色素是从一些动植物组织中提取的,安全性高,但资源较短缺。合成色素因其着色力强,易于调色,在食品加工过程中稳定性能好且价格低廉,在食品加工中得到广泛应用。但由于合成色素多以煤焦油为起始原料,且在合成过程中可能受铅、砷等有害物质所污染,因此在食用安全性上的争论要比其他类的食品添加剂更为突出。目前我国许可使用的合成色素有9种,分别为柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、新红、赤藓红、亮蓝、靛蓝、诱惑红等。在此介绍高效液相色谱法(依据GB/T5009.35-2003第一法)。
(1)原理食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取,制成水溶液,注入高效液相色谱仪,经反相色谱分离,根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。按下式计算:
式中X——试样中着色剂的含量,mg/g
m1——样液中着色剂的质量,ug
V2——进样体积,mL
V1——试样稀释总体积,mL
m2——试样质量,g
(2)色谱参考条件
色谱柱:YWG-C18,10um不锈钢柱,4.6mm(id.)×250mm。
流动相:甲醇-乙酸铵溶液(pH=4,0.02mol/L)。
梯度洗脱:甲醇:20%~35%,3%/min;35%~98%,9%/min;98%后继续6min。
流速:1mL/min.紫外检测器:254nm波长。
(3)要点提示本法最小检出量:新红5ng,柠檬黄4ng,苋菜红6ng,胭脂红8ng,日落黄7ng,赤藓红18ng,亮蓝26ng。
5.食品中抗氧化剂的测定
抗氧化剂是能防止或延缓食品成分的氧化变质、提高食品稳定性和延长储存期的一类食品添加剂。按其溶解性分为油溶性抗氧化剂与水溶性抗氧化剂。油溶性的有叔丁基羟基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)、特丁基对苯二酚(TBHQ)、没食子酸丙酯(PG)等;水溶性的有异抗坏血酸及其盐类等。按其来源可分为天然和人工合成两类。天然的有DL-α-生育酚(维生素E)、茶多酚等;人工合成的有BHA等。
抗氧化剂主要用于油脂及高油脂类食品,其作用机理是阻碍空气中的氧与油脂中的—C=C—反应形成过氧化链,从而防止油脂氧化酸败。
我国目前允许使用的抗氧化剂有BHA、BHT等14种。BHA和BHT的测定有气相色谱法、薄层色谱法和比色法三种国家标准法。在此介绍气相色谱法(依据GB/T5009.30-2003第一法)。
(1)原理试样中的叔丁基羟基茴香醚(BHA)和2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)用石油醚提取,通过层析柱使BHA与BHT净化,浓缩后,经气相色谱分离后用氢火焰离子化检测器检测,根据试样峰高与标准峰高比较定量。
(2)试剂
①石油醚(沸程30~60℃)。
②二氯甲烷(分析纯)。
③二硫化碳(分析纯)。
④无水硫酸钠(分析纯)。
⑤硅胶G(60~80日于120℃活化4h放干燥器备用)。
⑥弗罗里硅土(Florisil)(60~80目于120℃活化4h放干燥器中备用)。
⑦BHA、BHT混合标准储备液:准确称取BHA、BHT(纯度为99.9%)各0.1g,混合后用二硫化碳溶解,定容至100mL容量瓶中,此溶液分别为每1mL含1.0mg BHA.、BHT。置冰箱保存。
⑧BHA,BHT混合标准使用液:吸取标准储备液4.0mL于100mL容量瓶中,用二硫化碳定容至100mL,此溶液分别为每1mL含0.040mg BHA、BHT。置冰箱中保存。
(3)仪器
①气相色谱仪:附FID检测器。
②蒸发器:容积200mL。
③振荡器。
④层析柱:1cm×30cm玻璃柱,带活塞。
⑤气相色谱柱:柱长1.5m,内径3mm玻璃柱内装涂质量分数为10%的QF-1Gas Chrom Q(80~100目)。
文章来源:《食品理化检测技术》