乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的测定有免疫亲和层析净化液相色谱-串联质谱法、免疫亲和层析净化高效液相色谱法、免疫层析净化荧光分光度法和双流向酶联免疫法等四种国家标准方法。在此介绍免疫亲和层析净化液相色谱-串联质谱法(依据GB5413.37-2010中第一法)。

1.原理

试样液体或固体试样提取液经均质、超声提取、离心，取上清液经免疫亲和柱净化，洗脱液经氮气吹干，定容，微孔滤膜过滤，经液相色谱分离，电喷雾离子源离子化，多反应离子监测(MRM)方式检测。基质加标外标法定量。按下式计算：

式中x——试样中黄曲霉毒素M1的含量，ug/kg

p——试样中黄曲霉毒素M1的浓度，ng/mL

V——样品定容体积，mL

f——样液稀释因子

m—试样的称样量，g

2.液相色谱-质谱参考条件

(1)液相色谱参考条件

流动相：A液，0.1%甲酸溶液；B液，乙腈-甲醇溶液(1+1)；梯度洗脱：见表6-5；流动相流动速度：0.3mL/min；柱温：35℃；试液温度：20℃；进样量：10uL。

表6-5液相色谱梯度洗脱条件

注：1为即时变化，6为线性变化。

(2)质谱参考条件

检测方式：多离子反应监测(MRM)，详见表6-6中母离子、子离子和碰撞能量。扫描图见图6-10。

表6-6离子选择参数表

表6-7 离子源控制条件

图6-10 黄曲霉毒素M的子离子扫描图

黄曲霉毒素M1的色谱质谱图见图6-11。

图6-11 黄曲霉毒素M1的色谱质谱图

3.要点提示

(1)本法对应于ISO14501：2007 Milk and milk powder-determination of afla-toxin M，content-clean-up by immunoaffinity chromatography and determination by high-performance liquid chromatography。

(2)除本法外，《GB5009.24-2010食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素M1与B1的测定》也可用于牛乳及其制品中黄曲霉毒素M1的测定。

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文章来源：《食品理化检测技术》