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绘制实验室标准曲线,要注意这些事项!
时间:2021-04-14 13:57  浏览:252
  1.仪器一定要校验好。这个不用说为什么了。
  
  2.移取液体体积要精确,保证迅速准确,尽可能用一根移液管;为减少人为误差,同一种液体要一个人操作。
  
  3.保证标准品的纯度,所用标准品最好是新打开的,纯度较高的固体或溶液,防止污染。
  
  4.容器要保证洁净。容器保持清洁有时甚至比其他方面更重要,千万不要忽略。
  
  5.根据标准品理化性质注意加样的先后顺序。
  
  6.如果要测OD值,应保证测前各管液体充分混匀。
  
  7.若多次测试,有某个点误差较大,应舍弃。
  
  8.样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。
  
  9.并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈s型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度最陡段,即曲线几乎成直线的范围内。
  
  10.最好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
  
  11.检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。
  
  12.标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。
  
  13.做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数r至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。
  
  14.标准曲线需要人为的增加(0,0)点吗?
  
  不能增加。通常的标准系列多是配制0,1,2,3mg/L系列这样的说法,没做实验人为添加(0,0)很不妥,因为很多时候0管进入仪器可能也有响应值,这也是我们考察试剂空白的一个重要步骤。这个0管在某些时候非常重要,如,全血铅测定,我们采用牛血清来基体匹配标准系列,如果此时你用酸做空白或没做实验人为添加(0,0),那你就很难做好标准曲线,所以,标准曲线的0管也是做好标准曲线的重要考虑点。
  
  15.标准曲线需要减掉试剂空白来做吗?
  
  不需要。仪器测出来标准系列的响应值可以减掉试剂空白或减掉0管的响应值来做,工作中我们也常用0管来做仪器调零。其实没有必要那么麻烦,即使空白或0管有响应值,在构建标准曲线时,我们已经认为该响应值就是0浓度,也就是扣除了这个空白的。

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