1、原理
油脂受到光、热、空气中氧的作用,发生酸败反应,分解出醛、酸之类的化合物。丙二醛就是分解产物的一种,它能与TBA(硫代巴比妥酸)作用生成粉红色化合物,在532nm波长处有吸收高峰,利用此性质即能测出丙二醛含量,从而推导出油脂酸败的程度。
2、试剂
BA水溶液:准确称取TBA0.288g溶于水中,并稀释至100ml(如TBA不易溶解,可加热至全溶澄清,然后稀释至100ml),相当于0.02mol/L;
三氯乙酸混合液:准确称取三氯乙酸(分析纯)7.5g及0.1gEDTA,用水溶解,稀释至100ml;
丙二醛标准溶液:称取0.315g1,1,3,3-四乙氧基丙烷,溶解后稀释至1000ml,此溶液每ml相当于丙二醛100μg,置于冰箱内保存。准确吸取10ml,稀释至100ml,此溶液每毫升相当于丙二醛10μg,备用。
3、操作步骤
(1)标准曲线的绘制
准确吸取每相当于丙二醛10μg的标准溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于纳氏比色管中,加水至总体积5.00ml,加入5.00ml TBA溶液,然后按样品测定步骤进行,测得光密度绘制标准曲线。
(2)样品测定:
称取融化均匀的油脂样品10g(准确至0.0002g),置于100ml有盖三角瓶内,加入50.00ml三氯乙酸混合液,振摇半小时(保持油脂融溶状态,如冷结即在70℃水浴上略微加热使之融化后继续振摇)用双层滤纸过滤,除去油脂。滤液重复用双层滤纸过滤一次。
移取上述滤液5.00ml置于25ml比色管内,加入5.00ml TBA溶液,混匀,加塞,置于90℃水浴内保温40min,取出,摇匀,静置,冷却1h ,于532nm波长比色,对照标准曲线得到微克数(同时作空白试验)
4、计算
丙二醛含量(mg/kg)=
式中:C—从标准曲线查得丙二醛的微克数(ug)
m---样品质量(g)