色谱柱是由柱管和固定相组成,按照拄管的粗细和固定相的填充方式分为
(1)填充柱;
(2)毛细管柱。
色谱柱的平衡
反向色谱柱在经过出厂测试后是保存在甲醇(或乙腈)/水中的。请一定确保您所使用的活动相和甲醇(或乙腈)/水互溶,由于色谱柱在运输过程中可能会干掉,因此在用活动相分析样品之前,应使用分10-20倍的体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱。
假如您所使用的活动相中含有缓冲盐,应留意用含水量很高(约95%)的活动相过渡,样品分析完后,冲洗柱子是亦然。过往传统的方法使用纯水冲洗,对于非极性柱,如C8或C18,由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链,造成柱效下降。
另外,分析样品时,由于纯水在填料表面不能浸润形成水膜,出现样品不保存而分不开,重现性差,所以对于一般的C18或C8,有机溶剂不能低于5%。硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。假如该色谱柱需要使用含水或甲醇或乙腈的活动相,请在使用活动相之前用乙醇或异丙醇平衡。
色谱柱在平衡过程中,将流速缓慢地进步用活动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂浓度假如较低,则需要较长的时间平衡)。