1 标本的影响

 

 

       要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的酶促化学发光测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而使后面加入的HRP底物反应值偏高，造成假阳性。 样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。新鲜标本的检测结果更能准确反映机体的真实情况，应在采血后24小时内完成检测。血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清，血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，易造成假阳性结果。如24小时内不能进行检测，需将血清分离后，妥善保存于-20℃冰箱，做好原始记录，标本管上最好标上待检者姓名、日期，反复冻融，容易造成假阳性。

 

 

2 试剂影响

 

 

       化学发光免疫检测试剂厂家较多，不同厂家生产的试剂灵敏度与特异性存在一定的差别，使用质劣的试剂必然导至结果的假阳性或假阴性。因此，选择高质量的试剂是保证结果准确的关键之一。实验前，先将实验中所需的所有试剂及待测样品从冰箱中取出，待温度与室温（25℃）平衡1小时以上后使用。已开封试剂盒每次使用后需及时放回2～8℃冰箱内保存，应尽可能在开封后1个月内使用。不同批号试剂盒中组分不能混用，混用造成重复性差。

 

 

3 操作技术的影响

 

 

       吸量不准确，导至测定的重复性差，直接影响检测结果，因此加样器要经常清洗，定期校准。加样过快容易造成孔间污染。应避免加错样本。加样本及试剂时，避免加在孔壁上部非包被区，造成重复性差；温浴影响 ，弱阳性样本检测不出，温育的时间或温度不够。干浴与水浴存在明显的差异，尽可能使用水浴，并要求固相板放入水中，减少受热不均，贴密封膜，防止污物浸入；振荡影响，室温振荡，实验室室温应控制在25℃（实验室应加装空调机以确保室内温度在不同季节保持相对稳定），实验室应相对固定振荡器的振荡频率；洗板的影响，配制洗板液的蒸馏水要合格，量筒要干净，否则造成假阴性，洗板不干净，仪器**堵塞，容易造成假阳性：发光值的影响，洗板后，将等量的发光液A、B液混匀后，每孔加混合后的发光液，避免漏加。发光液变质容易造成假阴性。准确发光反映时间，发光反应时间太短，造成结果假阴性。

 

 

       综上所述，对临床化学发光免疫分析操作中出现的假阳性或假阴性结果，要从多方面进行分析，并采取相应措施排除干扰作用，从而为临床提供正确可靠的检测结果。