在实际工作中存在许多复杂因素影响微生物学检验，可能给检验结果带来偏差甚至错误，因此必须对影响检验结果的诸多因素采取控制手段保证检验结果的正确性，不断完善微生物检验的质量控制。

       影响微生物检验质量的因素：

       1、检验人员

       2、仪器设备

       3、检验培养基试剂

       4、检验环境

       5、采样

       6、检验质量

       7、检验的执行

       8、参考菌株及其保存

       9、检验报告及其结果质量控制

       1、检验人员

       （1）微生物检验不能完全依赖全自动鉴定仪器，检验工作中每一步骤均需要高度的主观分析判断能力，与个人的经验、技能和微生物检验基础知识水平密切有关。

       （2）除要求微生物检验人员必须具备严肃认真的工作态度，精密细致的观察和操作习惯，注重个人卫生外，还必须训练掌握微生物检验技术。

       （3）检验人员应执行上岗前培训制度，上岗前培训合格方能上岗操作，还要主动参加学习、培训、讲座、学习新技术，掌握微生物学检验方法，标准及相关法律法规。

       （4）参与编写测试程序及仪器操作程序，学习质量保证体系知识和计量学基本知识。

       （5）参加各类水平测试和盲样测试，提高检测水平和分析问题、解决问题的能力。

       （6）微生物负责人应定期对检验人员进行专业知识和操作熟练程度的考核，提高检验人员的素质。

       2、仪器、设备

       微生物检验的主要仪器及设备

       冰箱、生物安全柜、超净工作台、冰箱、生物安全柜、超净工作台、高压灭菌器、培养箱、水浴锅、pH计、显微镜、烘箱等。

       注意事项：

       要求所有的仪器和设备均应按照生产厂家的方法和有关规定正确使用。

       需要强制性定期检定的仪器和设备，经符合资历的计量部门校准合格后方可使用。

       对于常用的贵重仪器和设备，在使用前应加以检查，使用后要登记，要做到定期维护，以保证仪器处于良好的工作状态。

       （1）高压灭菌器

       A.操作人员应了解高压灭菌器的原理并遵守操作规则。

       B.放入的灭菌物品不宜放得过挤。

       C.使用时放入生物指示条或化学指示条；每天用水银留点温度计进行校准。

       D.每季度用生物指示剂进行监控。

       注意：实验室需要使用的无菌器具应能正确实施灭菌，无菌器具和器皿有明显标识。

       （2）培养箱

        A.箱内不应放入过热或过冷的物品，取放物品时应随手关闭箱门，以维持恒温。

       B.如培养物不慎泼洒到箱内，应马上清洁，并采取必要的消毒措施。

       C.培养物不宜与培养箱四周及最低层直接接触。

       D.每天记录温度的变化，如有偏差马上修正或维修。

       3、培养基、试剂

       微生物检验所用培养基必须由专业厂家生产，产品质量必须符合有关的质量标准，保存也应符合要求，防止潮解、结块等。培养基一旦变质不得再使用。

       （1）培养基的配制应严格按照标准规定的方法进行操作，并做好配制记录。

       （2）为保证培养基质量，在配制时应注意：制备培养基必须在玻璃容器或搪瓷缸中进行，如用铜、铁等金属器皿可能会对微生物生长有毒害作用。

       （3）使用专用的角匙取样品避免交叉污染。

       （4）配制时必须使用蒸馏水或去离子水，不得使用自来水。

       （5）不同类型的微生物对pH值得要求不同，配制时应测定pH值，如测定结果与所需要求不符，则用NaOH或HCL溶液进行调节。

       （6）制备好的培养基应及时使用，使用不完的如无特殊要求可室温或2-8度冷藏保存。

       4、检验环境

       微生物检验均在检验室进行，即不能让微生物散布出去，又必须使样品不再受污染，更不能允许病源菌感染检验人员，为此检验室的环境要求和卫生管理制度非常重要。

       （1）微生物检验室要求内外环境整洁，布局合理，操作区与办公区域分开。

       （2）洗涤室、培养室、消毒间、无菌室应分开，设有专室。

       （3）微生物室应备有自动或脚踩式洗手池和固定的消毒设施。

       （4）无菌室设有缓冲间。

       （5）定期对操作环境进行消毒

       （6）每天进行空气落菌实验。

        5、采样

       （1）采样工具和容器选用耐消毒灭菌的材料，采样工具不能使用消毒剂消毒，样品中不得加入防腐剂，以免影响检验结果的正确性。

       （2）在严格无菌操作的条件下，按国家规定的样品采集标准均匀准确地采样，并及时封口，使样品具有准确性和代表性。

       （3）每件样品封口后，贴上标签，做好记录，一般样品可在保存在2-8度的环境中，如是冷冻食品应保持在冷冻状态，并及时送件。

       （4）采样数量不能少于全部检验需要量的3倍，以供检验、复检、备查。

       6、检验质量

       除按国家标准方法对所需检验项目进行检测外，在实际工作中应还注意以下几个方面否则会影响检验结果的准确性：

       （1）在定量检验时用重量法还是体积法，检验结果会有误差，因为比重不等于1的样品，1ml和lg的检验结果绝不会相等，一般固态样品的宜用重量法，液体样品宜用体积法，但对于粘性液体（如酸牛奶），如用体积法会粘附一定量的样品在吸管上，因此此类样品最好用重量法。

       （2）如检样需用无菌水或无菌生理盐水稀释，则最好用匀质器处理制成均匀的菌悬液。

       （3）样品稀释时常会滞留少量样品在吸管内外，应多加注意，吸管插入样品或稀释液中应深浅一致，否则会影响检验结果，吸入液体后，应沿管壁慢慢注入递增的稀释液中特别注意此时吸管尖端切不可碰到稀释液中。

       （4）在培养基倾注入检样、菌悬液时注意培养基温度宜在45-50度之间，并使培养基与检样菌悬液充分混合。

       （5）微生物培养时，应根据要求选择正确的培养温度和时间。

       （6）应做空白对照，如果在空白对照中检出细菌，则可认为培养基质量存在问题获在操作过程中存在污染情况。另外采用标准菌种作阳性对照，观察培养基的质量情况。

       （7）整个检验过程应严格遵守无菌操作。

       （8）及时检查结果，做好原始数据记录。

       7、校验的执行

       仪器设备档案应包含以下内容：

       （1）仪器名称、编号、启用日期。

       （2）常规校验的方法和校验周期。

       （3）可以接受的操作范围。

       （4）仪器功能上的缺陷

       （5）常规维修的曰期

       注意事项：

       仪器只要不报废，维修记录必须保存。

       实验室应预先制定仪器校验计划，并按计划对需要强制性定期检定的仪器和设备进行检定。

       8、标准菌株及其保存

       （1）标准菌株可以从国际菌种保藏中心（ATCC、AS、MIG等）或室间质控活动中获得，准确鉴定过的分离株也可使样。

       （2）保存菌株应设专人妥善保管，菌株保存箱应加锁放置，取出使用应登记。

        9、检验报告及结果质量控制

       （1）对原始数据进行整理，用回归分析法和方差方法进行处理，去除不必要的误差，获得准确的数据。

       （2）应注意检验结果应与卫生标准的表示方法一致，定量检测以N*10n表示，N为两位有效数字。

       （3）有关人员签字后，加盖检验单位印章，以示有效，才能使检验结果既有法律依据又有学术依据。