色谱柱柱效如何检测?
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解决时间 2019-03-23 15:15
- 已解决maike
- 2019-03-23 15:06
最佳答案
- tianmei
- 2019-03-23 15:09
不同的色谱柱有不同的测试方法,来自不同厂家的同类色谱柱也往往采用不同的测试条件,所以最好按照色谱柱说明书中的测试报告测定柱效。一般工作站的数据处理都有自动计算柱效的功能,若没有工作站,可由公式计算:柱效(理论塔板数)等于保留时间与峰宽的比值的平方再乘以16,或保留时间与半峰宽之比值的平方再乘以5.54。 测定柱效时,不要接保护柱,同时注意连接的管路尽可能短,以减少死体积。 自己测定的柱效有时会低于出厂时测试报告给出的值,因为一般情况下,应用实验室没有专门用于测试柱效的仪器。当然,使用了一段时间的色谱柱的柱效是会下降的。 作为一个例子,下面给出Sepax的参考测试条件可用于C18(C8)柱效的测定。 流动相:乙腈/水(65:35)(v/v) 流速:1.0mL/min 检测波长:254nm 测试样品:Aniline(0.1%),Anisole(0.2%),Toluene(0.5%)(v/v) 进样体积:2.0uL